1. Klassifikatioun
Gel Elektrophorese gëtt a vertikal Typen opgedeelt (dorënner Kolonngelen a Plackgelen) an horizontalen Typen (haaptsächlech Plackgelen) (Figur 6-18). Allgemeng ass d'vertikal Trennung liicht méi héich wéi d'horizontal, awer d'horizontale Gelpräparatioun huet op d'mannst véier Virdeeler: et gëtt Ënnerstëtzung ënner dem ganze Gel, wat d'Benotzung vu Low-Concentration Agarose erlaabt; et ass méiglech Agarose Gel Placke vu verschiddene Spezifikatioune ze preparéieren; Gel Virbereedung a Probebelaaschtung si méi bequem; d'Elektrophoresekammer ass einfach ze konstruéieren a kosteneffektiv. Zënter datt horizontal Elektrophorese mat der Agarosegelplack komplett ënner der Uewerfläch vum Elektrophorese-Puffer ënner der Uewerfläch vun der Agarose-Gelplack ënnergeet gëtt, gëtt et och ënnerierdesch Elektrophorese genannt.
Elektrophoresis Tank DYCP-31DN fir Agarosegel Elektrophorese
2. Buffer System
An der Nukleinsäure Trennung adoptéieren déi meescht Systemer kontinuéierlech Systemer. Allgemeng benotzt Elektrophorese-Puffer enthalen TBE (0,08mol/L Tris·HCl, pH 8,5, 0,08mol/L Borsäure, 0,0024mol/L EDTA) Puffer an THE (0,04mol/L Tris·HCl, pH 7,8, 0,02mol/L) Natriumacetat, 0,0018 mol/L EDTA) Puffer. Dës Puffere ginn allgemeng als 10x Stammléisungen virbereet an op déi erfuerderlech Konzentratioun verdünnt wann se am Gebrauch sinn. D'Migratiounsraten vu linearer a kreesfërmeger DNA am Agarosegel variéiere mam Puffer benotzt. Am DEN Puffer ass d'Migratiounsquote vu linearer DNA méi grouss wéi déi vun kreesfërmeg DNA, wärend am TBE Puffer de Géigendeel ass wouer.
3.Virbereedung vun Agarose Gel
(1) Virbereedung vun horizontal Agarose Gel
(a) Bereet déi erfuerderlech Konzentratioun vun Agarosegel mat 1x Elektrophorese-Puffer.
(b) Hëtzt d'Agarose fir d'Opléisung ze kompletéieren entweder an engem kochendem Waasserbad, op engem magnetesche Rührer oder an enger Mikrowelle. Cool d'Agarose-Léisung op 55 ° C a füügt Ethidiumbromid (EB) Faarf op eng final Konzentratioun vun 0,5 μg / ml.
(c) Déckt d'Kante vu Glas oder Acrylplacke mat enger klenger Quantitéit Agarosegel, füügt e Kamm a positionéiert d'Kammzänn ongeféier 0,5 ~ 1,0 mm iwwer der Plack.
(d) Gidd déi geschmolten Agarosegelléisung kontinuéierlech an d'Glas oder d'Acrylplackform (d'Dicke hänkt vum Volume vun der DNA-Probe of), vermeit d'Aféierung vu Loftblasen. Loosst et natierlech bei Raumtemperatur verstäerken.
(e) Virsiichteg ewechzehuelen der comb no komplett solidification. Füügt eng entspriechend Quantitéit un Elektrophorese-Puffer an de Gel-Tank, a garantéiert datt d'Gelplack ongeféier 1 mm ënner der Uewerfläch vum Elektrophorese-Puffer ënnergeet ass.
(2) Virbereedung vun Vertikal Agarose Gel
(a) Fett oder Reschter vu Glasplacken erofhuelen andeems Dir mat Ethanol wäscht.
(b) Plaz Spacer Placke tëscht virun an hënneschter Damm, alignéiert d'Kante vun de Spacer Placke mat der viischter an hënneschter Damm, a befestegt se mat Klameren.
(c) Füügt 2% Agarose an 1x Puffer tëscht de Kante vun de Spacerplacke fir en 1 cm héich Agarose Plug um Enn vun der Gelgosskammer ze bilden.
(d) Gitt de geschmoltene Agarosegel an der gewënschter Konzentratioun, virbereet an 1x Puffer, an d'Gelkammer bis 1 cm ënner der Spëtzt.
(e) Setzt de Kamm un, vermeit Loftblasen ënner de Kamm Zänn ze fangen. Heiansdo kënnen Falten op de Kamm Zänn während Agarosegel Ofkillung erscheinen; an esou Fäll einfach e bësse geschmolten Agarose uewen drop setzen fir se ze verstäerken.
(f) Ewechzehuelen de Kamm. Fir d'Pufferleckage am Laaschtschlit ze vermeiden, verseet d'Verbindung tëscht der Agarosegelplack an der Elektrophoresekammer mat 2% Agarose a füügt déi erfuerderlech Quantitéit u Puffer derbäi.
(g) Füügt 1x Elektrophorese-Puffer an d'Gelkammer.
(h) Lued DNA Proben virsiichteg op den Agarosegel ënner dem Puffer.
Méi Informatioun iwwer d'Basiskenntnisser iwwer Agarosegel Elektrophorese wäerte mir d'nächst Woch deelen. Wënschen dës Informatioun hëllefräich fir Äert Experiment.
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) huet spezialiséiert op der Fabrikatioun vun Elektrophoreseinstrumenter fir méi wéi 50 Joer mat eisem eegene professionnelle techneschen Team a R&D Zentrum. Mir hunn zouverlässeg a komplett Produktioun Linn vum Design ze Inspektioun, a Lager, souwéi Marketing Ënnerstëtzung. Eis Haaptprodukter sinn Electrophoresis Zell (Tank / Chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analyse System etc.
Mir sichen elo fir Partner, souwuel OEM Elektrophorese Tank an Distributeuren si begréisst.
Wann Dir e Kafplang fir eis Produkter hutt, zéckt net eis ze kontaktéieren. Dir kënnt eis Message per E-Mail schécken[E-Mail geschützt]oder[E-Mail geschützt], oder rufft eis w.e.g. un um +86 15810650221 oder addéiert Whatsapp +86 15810650221, oder Wechat: 15810650221.
Scan w.e.g. den QR Code fir op Whatsapp oder WeChat derbäi ze ginn.
Post Zäit: Dez-07-2023