Polyacrylamid Gel Elektrophorese
Gel Elektrophorese ass eng fundamental Technik an Laboratoiren iwwer déi biologesch Disziplinnen, déi d'Trennung vu Makromoleküle wéi DNA, RNA a Proteinen erlaabt. Verschidde Trennungsmedien a Mechanismen erlaben Ënnerdeeler vun dëse Molekülle méi effektiv ze trennen andeems se hir kierperlech Charakteristiken ausnotzen. Besonnesch fir Proteinen ass Polyacrylamid Gel Elektrophorese (PAGE) dacks d'Technik vun der Wiel.
PAGE ass eng Technik déi Makromoleküle wéi Proteinen trennt baséiert op hirer elektrophoretescher Mobilitéit, dat heescht d'Fäegkeet vun Analyten fir sech op eng Elektrode vun der Géigendeel Ladung ze bewegen. Op PAGE gëtt dëst duerch d'Laascht, d'Gréisst (Molekülgewiicht) a Form vun der Molekül bestëmmt. Analyte beweegen sech duerch Pore geformt a Polyacrylamidgel. Am Géigesaz zu DNA a RNA, variéiere Proteine verantwortlech no den integréierten Aminosäuren, wat beaflosse kann wéi se lafen. Aminosaier Saiten kënnen och sekundär Strukturen bilden, déi hir scheinbar Gréisst beaflossen an doduerch wéi se fäeg sinn duerch d'Poren ze bewegen. Et kann dofir heiansdo wënschenswäert sinn Proteine virum Elektrophorese ze denaturéieren fir se ze lineariséieren wann eng méi genee Schätzung vun der Gréisst erfuerderlech ass.
SDS PAGE
Natrium-Dodecylsulfat Polyacrylamid Gel Elektrophorese ass eng Technik déi benotzt gëtt fir Proteinmoleküle vu Massen 5 bis 250 kDa ze trennen. D'Proteine ginn eleng op Basis vun hirem Molekulargewiicht getrennt. Natriumdodecylsulfat, en anionesche Surfaktant, gëtt an der Preparatioun vu Gele bäigefüügt, déi d'intrinsesch Ladungen vun de Proteinproben maskéieren an hinnen en ähnlecht Ladung zum Masseverhältnis ginn. An einfache Wierder denaturéiert et d'Proteine a gëtt hinnen eng negativ Ladung.
Native PAGE
Native PAGE ass eng Technik déi net-denaturéiert Gele fir d'Trennung vu Proteinen benotzt. Am Géigesaz zu SDS PAGE gëtt keen Denaturéierungsmëttel an der Preparatioun vu Gele bäigefüügt. Als Resultat fënnt d'Trennung vu Proteinen op Basis vun der Ladung an der Gréisst vun de Proteinen statt. An dëser Technik sinn d'Konformatioun, Klappt an Aminosaier Ketten vun de Proteinen d'Faktoren op deenen d'Trennung ofhängeg ass. D'Proteine sinn net an dësem Prozess beschiedegt, a kënnen nom Ofschloss vun der Trennung erëmfonnt ginn.
Wéi funktionéiert Polyacrylamid Gel Elektrophorese (PAGE)?
De Basisprinzip vu PAGE ass d'Analyten ze trennen andeems se se duerch d'Pore vun engem Polyacrylamidgel mat engem elektresche Stroum passéieren. Fir dëst z'erreechen, gëtt eng Acrylamid-Bisacrylamid-Mëschung polymeriséiert (Polyacrylamid) duerch d'Additioun vun Ammoniumpersulfat (APS). D'Reaktioun, déi duerch Tetramethylethylendiamin (TEMED) katalyséiert gëtt, bildt eng netähnlech Struktur mat Poren, duerch déi Analyte kënne beweegen (Figur 2). Wat méi héich de Prozentsaz vum Gesamt Acrylamid am Gel ass, wat méi kleng d'Poregréisst ass, also wat méi kleng d'Proteine kënnen duerchgoen. D'Verhältnis vun Acrylamid zu Bisacrylamid wäert och d'Poregréisst beaflossen, awer dëst gëtt dacks konstant gehal. Méi kleng Pore Gréissten reduzéieren och d'Geschwindegkeet mat där kleng Proteine sech duerch de Gel bewegen kënnen, hir Resolutioun verbesseren a verhënneren datt se séier an de Puffer lafen wann de Stroum ugewannt gëtt.
Ausrüstung fir Polyacrylamid Gel Elektrophorese
Gel Elektrophorese Zell (Tank / Chamber)
De Gel Tank fir Polyacrylamid Gel Elektrophorese (PAGE) ass anescht wéi den Agarose Gel Tank. Den Agarose Gel Tank ass horizontal, während de PAGE Tank vertikal ass. Duerch vertikal Elektrophoresezell (Tank/Kammer) gëtt en dënnen Gel (normalerweis 1.0mm oder 1.5mm) tëscht zwou Glasplacke gegoss a montéiert sou datt de Buedem vum Gel a Puffer an enger Chamber ënnergeet ass an d'Spëtzt am Puffer ënnergeet. an enger anerer Chamber. Wann de Stroum ugewannt gëtt, migréiert eng kleng Quantitéit Puffer duerch de Gel vun der ieweschter Chamber an déi ënnescht Chamber. Mat staarke Klameren fir ze garantéieren datt d'Versammlung an enger oprechter Positioun bleift, erliichtert d'Ausrüstung séier Gel Lafen mat souguer Ofkillung, wat zu ënnerschiddleche Bands resultéiert.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. D'Modeller DYCZ-20C an DYCZ-20G si vertikal Elektrophoresezellen (Tanks/Kammeren) fir DNA Sequenzéierungsanalyse. E puer vun de vertikalen Elektrophoresezellen (Tanks / Kammeren) si kompatibel mat Blotting System, wéi de Modell DYCZ-24DN, DYCZ-25D an DYCZ-25E sinn kompatibel mat Western Blotting System Modeller DYCZ-40D, DYCZ-40G an DYCZ-40F, déi benotzt gi fir de Proteinmolekül vum Gel op d'Membran ze transferéieren. No SDS-PAGE Elektrophorese ass Western Blotting eng Technik fir e spezifescht Protein an enger Proteinmëschung z'entdecken. Dir kënnt dës blotting Systemer no der experimentell Ufuerderunge wielen.
Elektrophorese Stroumversuergung
Fir d'Elektrizitéit fir de Gel ze liwweren, brauch Dir eng Elektrophorese-Energieversuergung. Bei Liuyi Biotechnologie bidden mir eng Rei vun Elektrophorese-Energieversuergung fir all Uwendungen. De Modell DYY-12 an DYY-12C mat héijer stabiler Spannung a Stroum kënnen Héichspannungsbedarf Elektrophorese treffen. Et huet d'Funktioun vum Stand, Timing, VH a Schrëtt-fir-Schrëtt Uwendung. Si sinn ideal fir IEF an DNA Sequencing Elektrophorese Uwendung. Fir allgemeng Protein- an DNA Elektrophoreseapplikatioun hu mir de Modell DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, a sou weider, déi och waarm Verkafsenergie mat Elektrophoresezellen (Tanks / Kammeren) sinn. Dës kënne fir d'Mëtt- a Low Volt Elektrophoreseapplikatioune benotzt ginn, wéi zum Beispill fir Schoullaboratoire, Spidollabo a sou weider. Méi Modeller fir Stroumversuergung, besicht w.e.g. eis Websäit.
D'Liuyi Mark huet méi wéi eng 50 Joer Geschicht a China an d'Firma kann stabil a qualitativ héichwäerteg Produkter op der ganzer Welt ubidden. Duerch Joerentwécklung ass et vun Ärem Choix wäert!
Fir méi Informatiounen iwwer eis, kontaktéiert eis w.e.g. per E-Mail[E-Mail geschützt] or [E-Mail geschützt].
Referenze fir Wat ass Polyacrylamid Gel Elektrophorese?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamid Gel Elektrophorese, Wéi et funktionnéiert, Technik Varianten, a seng Uwendungen
Post Zäit: Mee-23-2022