Mir hunn e puer Considératiounen d'lescht Woch fir d'Benotzung vun Celluloseacetat-Membranelektrophorese gedeelt, a mir wäerten dëst Thema haut hei fir Är Referenz ofschléissen.
Auswiel vun Buffer Konzentratioun
D'Puffer Konzentratioun, déi an der Celluloseacetat Membran Elektrophorese benotzt gëtt, ass allgemeng manner wéi déi, déi a Pabeierelektrophorese benotzt gëtt.Déi allgemeng benotzt pH 8,6BArbitragebuffer gëtt typesch am Beräich vun 0,05 mol / L bis 0,09 mol / L gewielt.Wann Dir d'Konzentratioun auswielt, gëtt eng virleefeg Bestëmmung gemaach.Zum Beispill, wann d'Längt vum Membranstreifen tëscht den Elektroden an der Elektrophoresekammer 8-10cm ass, ass eng Spannung vu 25V pro Zentimeter Membranlängt erfuerderlech, an d'aktuell Intensitéit soll 0,4-0,5 mA pro Zentimeter Membranbreet sinn.Wann dës Wäerter net während der Elektrophorese erreecht oder iwwerschratt ginn, sollt d'Pufferkonzentratioun erhéicht oder verdünnt ginn.
Eng exzessiv niddereg Pufferkonzentratioun wäert zu enger séierer Bewegung vun de Bands an enger Erhéijung vun der Bandbreet féieren.Op der anerer Säit wäert eng exzessiv héich Pufferkonzentratioun d'Bandmigratioun verlangsamen, wat et schwéier mécht verschidde Trennungsbänner z'ënnerscheeden.
Et sollt bemierkt datt an der Celluloseacetat Membran Elektrophorese e wesentlechen Deel vum Stroum duerch d'Probe gefouert gëtt, wat eng bedeitend Quantitéit un Hëtzt generéiert.Heiansdo kann déi gewielte Pufferkonzentratioun als passend ugesi ginn.Wéi och ëmmer, ënner Bedéngungen vun enger erhéiter Ëmwelttemperatur oder wann Dir méi héich Spannung benotzt, kann d'Verdampfung vum Waasser duerch d'Hëtzt verstäerken, wat zu enger exzessiv héich Pufferkonzentratioun resultéiert an och d'Membran dréchen.
Sample Volume
An der Celluloseacetat Membran Elektrophorese gëtt de Betrag vum Probevolumen duerch verschidde Faktoren festgeluegt, dorënner Elektrophoresebedéngungen, Eegeschafte vun der Probe selwer, Faarfmethoden an Detektiounstechniken.Als allgemenge Prinzip, wat méi sensibel d'Detektiounsmethod ass, dest méi kleng kann de Probevolumen sinn, wat avantagéis ass fir d'Trennung.Wann de Probevolumen exzessiv ass, kënnen d'elektrophoretesch Trennungsmuster net kloer sinn, an d'Faarwen kann och Zäitopwänneg sinn.Wéi och ëmmer, wann Dir déi getrennte gefärbte Bands quantitativ analyséiert mat elutiounskolorimetresche Detektiounsmethoden, sollt de Probevolumen net ze kleng sinn, well et zu méi nidderegen Absorptiounswäerter fir bestëmmte Komponenten resultéiere kann, wat zu méi héije Feeler bei der Berechnung vun hirem Inhalt féiert.An esou Fäll sollt de Probevolumen entspriechend erhéicht ginn.
Typesch ass de Probevolumen, deen op all Zentimeter vun der Probeapplikatiounslinn bäigefüügt gëtt, rangéiert vun 0,1 bis 5 μL, gläichwäerteg zu engem Probebetrag vu 5 bis 1000 μg.Zum Beispill, an der Routine Serum Protein Elektrophorese Analyse, ass de Probevolumen, deen op all Zentimeter vun der Uwendungslinn bäigefüügt gëtt, allgemeng net méi wéi 1 μL, gläichwäerteg mat 60 bis 80 μg Protein.Wéi och ëmmer, wann Dir Lipoproteine oder Glykoproteine analyséiert mat der selwechter Elektrophoresemethod, muss de Probevolumen entspriechend erhéicht ginn.
Als Conclusioun soll de gëeegentste Probevolumen ausgewielt ginn op Basis vu spezifesche Konditiounen duerch eng Serie vu virleefeg Experimenter.
Auswiel vun staining Léisung
Déi getrennte Bänner an der Celluloseacetat Membran Elektrophorese ginn typesch virun der Detektioun gefierft.Verschidde Probekomponente erfuerderen verschidde Faarfmethoden, an d'Faarwemethoden gëeegent fir Celluloseacetat Membran Elektrophorese kënnen net ganz op Filterpabeier applicabel sinn.
Et ginn dräi Haaptprinzipien fir eng Faarfléisung ze wielencellulose Acetat Membran.Éischtens,Waasserlöslech Faarfstoffer sollten iwwer alkohollöslech Faarfstoffer bevorzugt ginn, fir Membranschrumpfung a Verformung ze vermeiden, déi duerch d'Faarfléisung vun der leschter verursaacht gëtt.Nom Färzen ass et wichteg d'Membran mat Waasser ze spülen an d'Faarfdauer ze minimiséieren.Soss kann d'Membran gekrauselt oder geschrumpft ginn, wat déi spéider Detektioun beaflosst.
Zweetens ass et léiwer Faarfstoffer mat staarker Faarfaffinitéit fir d'Probe ze wielen.An der Celluloseacetat Membran Elektrophorese vu Serumproteine gëtt Aminoschwaarz 10B allgemeng benotzt wéinst senger staarker Faarfaffinitéit fir verschidde Serumproteinkomponenten a seng Stabilitéit.
Drëttens, zouverlässeg Qualitéitsfaarwen solle gewielt ginn.E puer Faarfstoffer, trotz dem selwechten Numm, kënnen Gëftstoffer enthalen, déi nom Färzen zu engem besonnesch donkelen Hannergrond resultéieren.Dëst kann souguer déi ursprénglech gutt getrennte Bänner verschwannen, sou datt se schwéier z'ënnerscheeden.
Schlussendlech ass d'Wiel vun der Faarfléisungskonzentratioun wichteg.Theoretesch kann et schéngen datt eng méi héich Faarfléisungskonzentratioun zu méi grëndlecher Faarf vu Probekomponenten a bessere Faarfresultater féiert.Allerdéngs ass dëst net de Fall.D'verbindlech Affinitéit tëscht de Probekomponenten an dem Faarfstoff huet eng gewësse Limit, déi net mat der Erhéijung vun der Konzentratioun vun der Faarfléisung eropgeet.Am Géigendeel, eng exzessiv héich Konzentratioun vu Faarfléisungen verschwendt net nëmmen de Faarfstoff, awer mécht et och schwéier fir e kloren Hannergrond z'erreechen.Ausserdeem, wann d'Faarfintensitéit e bestëmmte maximale Wäert erreecht, ass d'Absorptiounskurve vum Faarfstoff net eng linear Bezéiung, besonnesch a quantitativen Miessunge.
Detailer iwwer Beijing Liuyi Biotechnologie ze wëssen's cellulose Acetat MembranElektrophoresetank a seng Elektrophoreseapplikatioun, besicht w.e.g. hei:
lExperiment fir d'Trennung vum Serumprotein duerch Cellulose Acetat Membran
lCellulose Acetat Membran Elektrophorese
Wann Dir e Kafplang fir eis Produkter hutt, zéckt net eis ze kontaktéieren.Dir kënnt eis Message op Email schécken[E-Mail geschützt]oder[E-Mail geschützt], oder rufft eis w.e.g. un um +86 15810650221 oder addéiert Whatsapp +86 15810650221, oder Wechat: 15810650221.
Referenz:Electrophoresis (zweet Editioun) vum Här Li
Post Zäit: Jun-06-2023